期刊简介
本刊为综合性医学学术期刊，反映该校学科科研进展与动态，刊登基础医学方面的研究成果及临床诊疗经验。主要栏目有：基础研究、临床研究、技术方法、经验交流、病例报告、科研管理、短篇报道等。读者对象为医学研究人员、医务工作者及医学院校师生。本刊被美国《医学索引》（IM）、《化学文摘》等收录，2005年中国科技信息所公布的影响因子为0.869。
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首页>南方医科大学学报杂志
- 杂志名称：南方医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：南方医科大学
- 国际刊号：1673-4254
- 国内刊号：44-1627/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国综合性医药卫生类核心期刊期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
狨猴血清中重组人5型腺病毒中和抗体滴度的测定
孙亚纯；李婷婷；王一琳；张玲；朱海；黎诚耀
关键词：普通棉耳狨猴, 腺病毒5型, 荧光素酶, 绿色荧光蛋白, 中和试验
摘要：目的：构建表达荧光素酶与绿色荧光蛋白报告基因的重组人5型腺病毒rAd5/Luc/GFP，检测血清中和抗体佳实验方法，分析小型灵长类动物普通棉耳狨猴体内腺病毒5型中和抗体水平，为评价腺病毒载体疫苗提供实验动物基础数据。方法利用ADMax包装系统，首先构建穿梭质粒pDC315-Luc-GFP，将所得的穿梭质粒和骨架质粒pBHGloxΔE1，3Cre共转染293A细胞，进行重组人5型腺病毒（rAd5/Luc/GFP）的包装。通过3次空斑形成实验筛选出单克隆重组腺病毒，并在大量扩增单克隆腺病毒后用CsCl密度梯度离心法进行浓缩纯化。采用TCID50法测定纯化后病毒滴度，并挑选进行中和实验的优病毒滴度。将合适病毒滴度的rAd5/Luc/GFP与狨猴血清混合预孵育后感染293A细胞，分别采用化学发光法及流式细胞术，对14只普通棉耳狨猴血清中腺病毒5型中和抗体进行检测。结果 PCR、酶切和测序结果均表明穿梭质粒pDC315-Luc-GFP构建成功；GFP检测结果证明重组人5型腺病毒rAd5/Luc/GFP包装扩增成功，病毒滴度可达6.9×101.5 PFU/mL。两种不同方法检测检测14只狨猴的中和抗体结果一致性较好（P<0.05，Kappa=0.811），化学发光法或流式细胞术检测阳性狨猴比率分别为28.6%（4/14）或21.4%（3/14），化学发光法检测得其中2只狨猴中和抗体滴度为1/16，另2只为1/32，而流式细胞术检测得滴度均为1/16。结论化学发光法是一种快速，准确，适用于多物种的方法，其灵敏度略高于以GFP为报告基因的流式细胞术（7.2%）。普通棉耳狨猴体内Ad5血清阳性率较低，有望应用基于此型或其他型别腺病毒作为载体进行基因治疗和基因疫苗研究。
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