期刊简介
本刊为综合性医学学术期刊，反映该校学科科研进展与动态，刊登基础医学方面的研究成果及临床诊疗经验。主要栏目有：基础研究、临床研究、技术方法、经验交流、病例报告、科研管理、短篇报道等。读者对象为医学研究人员、医务工作者及医学院校师生。本刊被美国《医学索引》（IM）、《化学文摘》等收录，2005年中国科技信息所公布的影响因子为0.869。
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首页>南方医科大学学报杂志
- 杂志名称：南方医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：南方医科大学
- 国际刊号：1673-4254
- 国内刊号：44-1627/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国综合性医药卫生类核心期刊期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
FoxM1 shRNA慢病毒载体构建及感染人前列腺癌细胞的稳定细胞株筛选
王一茹；姚斌伟；张艳；张明博；高菡静；唐杰
关键词：FOXM1, 前列腺癌, 慢病毒载体, 稳定细胞株
摘要：目的：构建携带绿色荧光蛋白（GFP）的人FoxM1 shRNA重组慢病毒载体，并构建筛选FoxM1敲低的人前列腺癌稳定细胞株，检测FoxM1的表达及对细胞增殖能力的影响。方法设计并合成3对特异性针对人FoxM1基因的shRNA靶序列，构建到pHBLV-U6-ZsGreen-Puro慢病毒载体中，测序鉴定载体构建情况，利用慢病毒三质粒系统转染包装293T细胞，荧光显微镜下观察转染效率。收集到的病毒上清转染人前列腺癌DU-145细胞，Real-time PCR检测各组细胞FoxM1 mRNA水平，经嘌呤霉素筛选建立FoxM1敲低稳定细胞株，用Western blotting法检测细胞中FoxM1表达，并用MTT法观察稳转细胞的生长增殖活性，流式细胞术观察稳转细胞凋亡情况，平板克隆实验观察稳转细胞的克隆形成能力。结果经测序鉴定成功构建了3对FoxM1 shRNA慢病毒载体，并进行包装，感染DU-145细胞后Real-time PCR检测结果表明第1对慢病毒载体干扰效率佳，嘌呤霉素抗性筛选建立了FoxM1敲低稳定细胞株，荧光显微镜观察感染效率较高，Western blotting结果显示细胞中FoxM1蛋白表达明显受到抑制，细胞的生长增殖能力明显受限，流式细胞术结果显示FoxM1敲低组细胞凋亡率高于对照组，平板克隆实验结果表明FoxM1敲低组细胞克隆形成能力下降。结论本研究成功构建了FoxM1 shRNA慢病毒载体，建立了FoxM1敲低稳定前列腺癌细胞株，抑制细胞内FoxM1的表达能够抑制前列腺癌细胞DU-145的生长增殖、克隆形成能力，并能诱导细胞凋亡。
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