期刊简介

               本刊为综合性医学学术期刊,反映该校学科科研进展与动态,刊登基础医学方面的研究成果及临床诊疗经验。主要栏目有:基础研究、临床研究、技术方法、经验交流、病例报告、科研管理、短篇报道等。读者对象为医学研究人员、医务工作者及医学院校师生。本刊被美国《医学索引》(IM)、《化学文摘》等收录,2005年中国科技信息所公布的影响因子为0.869。                

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  • 杂志名称:南方医科大学学报杂志
  • 主管单位:广东省教育厅
  • 主办单位:南方医科大学
  • 国际刊号:1673-4254
  • 国内刊号:44-1627/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国综合性医药卫生类核心期刊期刊收录:万方收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
南方医科大学学报杂志2008年第03期

体外拼接破伤风毒素C片段基因

杨晓强;武金宝;姜泊;赵亚刚;陈学清

关键词:区段基因拼接, 破伤风毒素, C片段
摘要:目的 以破伤风毒素C片段(TETC)基因为例,探讨区段基因拼接方法.方法 根据已知的TETC基因序列(GenBank登记号M12739,367-1719),结合乳链菌氨基酸密码子的基因编码情况,设计适于在乳链菌内表达的TETC基因序列,为进一步克隆,根据同义突变的原理消除序列中的EcoR I和Kpn I的酶切位点,在TETC基因的5'端加上Sal I酶切位点.3'端加上Xho I和Hind Ⅲ酶切位点,序列全长1383 bp.将其中1380 bp的片段使用DNAstar 6.0设计为68条长40 bp的寡核苷酸TETC1-TETC6B,设计TETC69作为下游引物.分3个区段分别拼接TETC1-24、TETC23-46、TETC45-68,随后分别以TETC1、TETC69为上下游引物,进行TETC全长基因的拼接,将获得的TETC基因经Sal I和HindⅢ双酶切后连接到经相同双酶切的pBluescript ⅡSK(+),得到的阳性克隆经测序鉴定.结果 分别拼接出大小约500bp的TETC1-24、TETC23-46、TETC45-68,等浓度的3个区段混合后,拼接出了全长为1383 bpTETC基因,目的基因连接到载体后测序与设计的TETC基因完全一致.结论 区段基因拼接法采用分段拼接的方法先拼接出全长基因的组成部分,随后进行全长基因拼接.更适合长基因片段的体外拼接.