期刊简介
本刊为综合性医学学术期刊，反映该校学科科研进展与动态，刊登基础医学方面的研究成果及临床诊疗经验。主要栏目有：基础研究、临床研究、技术方法、经验交流、病例报告、科研管理、短篇报道等。读者对象为医学研究人员、医务工作者及医学院校师生。本刊被美国《医学索引》（IM）、《化学文摘》等收录，2005年中国科技信息所公布的影响因子为0.869。
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首页>南方医科大学学报杂志
- 杂志名称：南方医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：南方医科大学
- 国际刊号：1673-4254
- 国内刊号：44-1627/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国综合性医药卫生类核心期刊期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
大肠杆菌内同源重组法构建含mIκBα基因的重组腺病毒及其在Hep G2细胞中的表达
金吴东；陈龙华；穆峰
关键词：mIκBα基因, 腺病毒载体, 基因治疗, 大肠杆菌
摘要：目的通过在大肠杆菌内同源重组,快速、有效地制备含人mIκBα基因的腺病毒重组体的方法,并观察其在肝癌细胞株Hep G2细胞中的表达.方法首先将目的基因mIκBα克隆进结合有绿色荧光蛋白报告基因的穿梭质粒 -pAdTrack-CMV中,将新形成的质粒pAdTrack-CMV-mIκBα用限制性内切酶PmeI线性化后,再与腺病毒骨架质粒-pAdEasy-1一同转化进大肠杆菌株BJ5183细胞中.用对卡那霉素抗性挑选重组体质粒-pAd-mIκBα,并通过限制性内切酶分析,确认重组.后将线性化后的重组体质粒转染进腺病毒包装细胞株293细胞.腺病毒重组体Ad-mIκBα在7～10 d内产生.借助GFP的表达,测定和观察在293细胞中重组腺病毒的滴度及其在HepG2细胞中的表达.结果经PCR检测提示重组体腺病毒含有mIκBα基因.Ad-mIκBα的滴度是2.7×109PFU/ml.当MOI等于10时,在HepG2细胞中,Ad-mIκBα病毒可有效和稳定地表达,其感染效率24 h为57%,48 h达100%.结论运用在大肠杆菌内同源重组法能有效和方便地构建含目的基因mIκBα的腺病毒重组体Ad-mIκBα.该重组体能在293细胞中扩增,并有效地感染Hep G2细胞.为进一步研究mIκBα基因的功能和该基因治疗肝癌提供了一个良好的基因转导载体.
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