期刊简介
本刊为综合性医学学术期刊，反映该校学科科研进展与动态，刊登基础医学方面的研究成果及临床诊疗经验。主要栏目有：基础研究、临床研究、技术方法、经验交流、病例报告、科研管理、短篇报道等。读者对象为医学研究人员、医务工作者及医学院校师生。本刊被美国《医学索引》（IM）、《化学文摘》等收录，2005年中国科技信息所公布的影响因子为0.869。
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首页>南方医科大学学报杂志
- 杂志名称：南方医科大学学报杂志
- 主管单位：广东省教育厅
- 主办单位：南方医科大学
- 国际刊号：1673-4254
- 国内刊号：44-1627/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国综合性医药卫生类核心期刊期刊收录：万方收录(中), 国家图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美)
经典方法与LaSRT法测定绿色荧光蛋白标记重组病毒滴度的研究
江千里；王健民；江汕；温丽敏；周虹
关键词：流式细胞术, 基因重组逆转录病毒, 病毒滴度测定法, 绿色荧光蛋白
摘要：目的以带有绿色荧光蛋白(GFP)标记基因的重组逆转录病毒为例,对经典方法与批量快速病毒滴度法(LaSRT)测定病毒滴度进行比较研究.方法(1)经典方法:于6孔培养板分别接种NIH3T3细胞2×105/孔,培养12 h后分别以0.5 m1、50μl和5μl带有GFP标记基因的病毒感染,聚凝胺终浓度为8μg/ml,48 h后以流式细胞仪检测细胞eGFP+率.病毒滴度(TU/m1)=(2×105×细胞eGFP+率)/病毒原液体积.(2)LaSRT法:NIH3T3细胞以5000/孔接种于96孔板,12 h后更换成完全培养液90μl/孔,以8孔为一组,第1孔中加入病毒液10μl,此后每孔依次10:1倍比稀释,聚凝胺终浓度为8 μg/ml,48 h后以浓度自高到低的方向,在荧光倒置显微镜下确定计量孔(第n孔),计数孔中的阳性细胞数m.病毒滴度(TU/m1)=m×10n+1.(3)对7批病毒以LaSRT法研究,探讨冻存/复苏过程对重组病毒滴度的影响.结果经典方法测定的重组病毒滴度为(1.54±0.38)×106TU/ml,LaSRT法测定的病毒滴度为(1.33±0.57)×106TU/ml,两者无统计学差异(P＞0.05).LaSRT法可以大批量、快速地测定以GFP为标记基因的重组病毒滴度.单次冻存/复苏后的病毒滴度为冻存前的(18.1±9.9)%(n=7).结论LaSRT法和经典方法测定以GFP为标记基因的重组病毒滴度,结果无统计学差异;LaSRT法获得结果简便、快速、经济,适合基因治疗的基础和临床研究.
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